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| 一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 肖志忠; 韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 其特征在于：将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合 抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中 添加剂：蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄（v/v）。 混合后经过两步降温处理 稀释液为nacl8g/l 抗冻剂为终浓度60%（v/v）的dmso（二甲基亚砜）或终浓度60%（v/v） 一步平衡后投入到液氮（‑196℃） Kcl0.4g/l 的丙二醇（pg） 分装保存 Mgso4·7h2o0.1g/l Mgcl2·6h2o0.1g/l Na2hpo4·2h2o0.06g/l Kh2po40.06g/l Nahco30.35g/l |
| 一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 其特征在于：将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻 其中 溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液 稀释液为nacl 离心收集沉淀 Kh2po4和水组成。 而后与牙鲆卵子进行人工授精 |
| 电感耦合等离子体质谱测定海水中的锂、铷、硼、锶 期刊论文
海洋科学, 2013, 期号: 10, 页码: 86-89
作者: 殷学博; 王晓媛; 李三忠; 曾志刚
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电感耦合等离子体质谱(Icp-ms) 稀释 海水 微量元素 |
| 一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成 其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合 处理后投入到液氮（‑196℃） 在0℃孵育6‑8分钟 分装保存 抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油） 孵育后以分段方式降温处理 其中 稀释液为100mm蔗糖 100mm khco3 添加剂：5mm还原型谷胱甘肽 25mm nahco3 50mm牛磺酸 10%蛋黄（v/v）。 |
| 太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 于道德; 官曙光
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孵育后以分段方式降温处理 一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 其特征在于：将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合 混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟 处理后投入到液氮（‑196℃） 抗冻剂为终浓度10%（v/v）的丙二醇（pg） 分装保存 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成 添加剂为：终浓度5%（v/v）的蛋黄和终浓度5%bsa（v/v）。 其中稀释液为：nacl 8g/l Na2hpo4·2h2o0.6g/l Kh2po40.6g/l 海藻糖37.8g/l |
| 黄、东海春季和秋季微型浮游动物对浮游植物的摄食压力 期刊论文
海洋科学, 2011, 期号: 1, 页码: 36-39
作者: 张武昌; 张翠霞; 王荣; 肖天
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微型浮游动物 稀释培养 摄食压力 黄海 东海 |
| 一种环保无溶剂带水带锈防腐涂料 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810249526.8, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
发明人: 李伟华; 田惠文; 金国善; 邓俊英; 侯保荣
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并添加有改性树脂1-5份、带锈涂装复合颜料40-60份、分散剂/附着力促进剂2-3份、消泡剂0.5-2份为填料 一种环保无溶剂带水带锈防腐涂料 其特征在于：所述防腐涂料主要由甲、乙组分和活性稀释剂组成 按质量份数计 所述乙组分为腰果壳油改性长链酚醛胺固化剂 甲组分以环氧值为0.48-0.54的环氧树脂作为涂料成膜树脂基体 甲组分对乙组分的质量份数比为4-8∶1 所述活性稀释剂的有效成为由环氧氯丙烷合成的脂环族缩水甘油醚 用量为20-40份 用量为10-20质量份。 |
| 一种快速分离厌氧微藻的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910230547.X, 申请日期: 2010-05-19, 公开日期: 2010-05-19
发明人: 王广策; 乔洪金; 张晓娟; 朱大玲; 潘光华
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一种快速分离厌氧微藻的方法 其特征在于：将待分离样品加入盛有tap培养基的器皿中 取上述富集培养的待分离样品1ml 然后用灭菌的液体石蜡密封 稀释至10-5 若上述培养基中出现蓝色或绿色藻落 置于光照培养箱中以25或30℃ 10-6和10-7三个稀释度 即为待分离样品中存在厌氧微藻 若上述培养基中没有出现蓝色或绿色藻落 40μmol·m-2·s-1条件下培养直至上层液体变成绿色 将三个梯度的待分离样品分别涂于加入1.5％琼脂、冷却的tap培养基上 即为待分离样品中不存在厌氧微藻。 使待分离样品充分富集生长 然后再铺一层加入1.5％琼脂的tap培养基 待用 而后再铺一层低熔点固体石蜡 使其处于密封厌氧状态 倒置于光照培养箱中以25或30℃ 40μmol·m-2·s-1条件下培养5-10天 |
| 一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510136709.5, 申请日期: 2007-07-04, 公开日期: 2007-07-04
发明人: 许建和; 尤锋; 张培军; 吴雄飞; 徐永立; 蒋宏雷
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权利要求书1、一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法 包括：精液保存、精液稀释、精子遗传物质失活 ②精液稀释：采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液 其特征在于：①精液保存：将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2～4℃低温条件下备用 稀释倍数为20～100倍 其中：按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为nacl 0.60～0.80％ 稀释液预冷到0～5℃ 然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0～5℃的培养皿中 Kcl 0.03～0.05％ Ph 其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1～0.3cm Cacl2 7.0～7.3 其中：紫外光源的照射剂量为1800～6000erg/mm2。 0.01～0.03％ ③精子遗传物质失活：紫外光源预热5～10min后 葡萄糖0.05～0.10％ 将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下 照射1.5～5min 使得大黄鱼遗传物质失活 |
| 一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
发明人: 朱香萍; 尤锋; 张培军; 孙威; 徐永立
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权利要求书1、一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法 其特征在于包括步骤如下：①采用改进的哌嗪-n ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵 N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定 并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来 ③在常温下用浓度百分比为1-2％的triton-100对样品进行打孔处理 受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时 再在含有80-200mm Nabh4的磷酸盐缓冲液中 其中：磷酸盐缓冲液成分为128mm Nacl 磷酸吐温缓冲溶液清洗 室温下抚育6-16小时 2mm Kcl ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色 然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存 8mm Nah2po4 其中：抚育抗体前非特异结合位点不封闭 抚育一抗过夜 抗体稀释液含有浓度百分比为10％的山羊血清和5％的二甲亚砜的tris盐酸缓冲液 待用 2mmkh2po4 抚育二抗为避光2-4小时 清洗液为含有155mm Nacl、10mm Tris-cl、ph为7.2-7.4的tris盐酸缓冲液 ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。 Ph 7.2-7.4 及诺纳德p-40 其中诺纳德p-40占tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2％ |
