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海洋沉积物中微生物基因组DNA提取方法的比较研究 CNKI期刊论文
2017
作者:  贺惠;  张玉;  甄毓;  米铁柱;  陈阳阳;  于志刚
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沉积物  微生物  DNA提取  
玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究 CNKI期刊论文
2016
作者:  吕曼;  类彦立;  李铁刚
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玻璃质壳  底栖有孔虫  分子生物学  Ammonia  DNA提取  保存  
玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究 期刊论文
海洋与湖沼, 2016, 卷号: 47, 期号: 2, 页码: 346-353
作者:  吕曼;  类彦立;  李铁刚
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玻璃质壳  底栖有孔虫  分子生物学  Ammonia  Dna 提取  保存  
底栖有孔虫的不同壳质类型DNA提取技术比较及青岛湾潮间带分子多样性研究 学位论文
, 北京: 中国科学院大学, 2015
作者:  吕曼
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底栖有孔虫  Dna提取  Dna保存  Rdna  高通量测序  
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人:  尤锋;  吴志昊;  王伟;  徐冬冬;  张毅;  张培军;  徐永立
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1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇  一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  滤去水后立即加入无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  而后于?20℃或室温保存备用  加入生理盐水洗涤  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液  4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液  再用滤纸吸干样品  使细胞破壁  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  重复2?3次  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶  吸取上清液使蛋白质去除  震荡混匀  然后在上清液中加入等体积异丙醇  于50?70℃温育  轻轻混匀  每10?20分钟颠倒混匀一次  ?20℃静置1?2小时  消化至溶液澄清  15000g离心15分钟  待用  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。  
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
发明人:  崔朝霞;  张姝;  栾维莎;  刘媛
Adobe PDF(1224Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:377/1  |  提交时间:2014/08/04
一种海蜇基因组dna提取方法  其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存  2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆、30~40ul质量浓度为10%的sds、3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k  封口后55~56℃消化0.8~1.0小时  3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6m?nacl  待用  振荡浑匀20~30s  10000~12000rpm离心20?30分钟  吸上清  而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇  ?20~?18℃沉淀10~15分钟  沉淀后取出  以10000~12000rpm离心15?20分钟  弃去液体  并用体积浓度为70%的乙醇  离心洗1~2次  自然室温凉干  即得到海蜇碟状体的dna。  
一种海蜇基因组DNA的提取方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14
发明人:  崔朝霞;  张姝;  栾维莎;  刘媛
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1.一种海蛰基因组dna提取方法  其特征在于:1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织  2)将步骤1)得到的原料内加入3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k  加入ctab Buffer300~400ul  在55~56℃消化24~26小时至溶液澄清  3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶液混匀  待用  待用  离心  而后向上清液中加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇  吸上清  -20~-18℃沉淀10~15分钟  其中苯酚、氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1  再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀  沉淀后取出  氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。  离心  离心  吸上清  弃去液体  并用体积浓度为70%的乙醇  离心洗1~2次  将多余液体倒去室温自然凉干  即得到海蛰螅状体的基因组dna  
龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
发明人:  段德麟;  李文红;  胡自民
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1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法  其特征在于:龙须菜的rdnaits全序列的获取  提取缓冲液的组成为:100mmoll-1tris.hcl  步骤如下:(1)总dna提取:取新鲜健康的藻体材料  Ph8.0  (2)Pcr扩增:龙须菜its区扩增的特异引物p1、p2的序列分别为:p1:5’gggatccgtttccgtaggtgaacctgc3’  用无菌水处理后  50-100mmoll-1edta  位于18s上  P2:5’gggatccatatgcttaagttcagcgggt3’  (3)Pcr产物纯化  在液氮种研磨成粉末  0.2-0.5mnacl  位于26s上  利用该引物对步骤(1)提取的dna为模板  提取总dna  5%β-巯基乙醇  对总dna进行pcr扩增反应  0.2%pvp-40  (4)Dna序列测定:纯化后的dna进行序列测定  1.0-2.5%sds  确立rdnaits区  (5)Dna序列数据分析:待分析的rdnaits区的序列一经测定  提取所用的kac浓度为4.0-5.0m  包括its1和5.8s区的全序列  用对位排列软件clustalw进行对位排列  建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的rapd和issr特异指纹图谱  Ph值范围在5.2-7.5  并辅以人工校对  步骤如下:1)总dna提取  2)Rapd和issr引物的合成  用系统进化分析各样品dna序列与数据库中各个序列间的差异  从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物  3)根据扩增条带的多态性  构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的rapd和issr特异指纹图谱。  
海湾扇贝样品不同保存条件下DNA的提取及RAPD扩增比较 CNKI期刊论文
2001
作者:  刘保忠,宋林生,相建海
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海湾扇贝  DNA提取  RAPD