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| 海洋沉积物中微生物基因组DNA提取方法的比较研究 CNKI期刊论文 2017 作者: 贺惠; 张玉 ; 甄毓; 米铁柱; 陈阳阳; 于志刚
 收藏  |  浏览/下载:3/0  |  提交时间:2024/12/18 沉积物 微生物 DNA提取 |
| 玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究 CNKI期刊论文 2016 作者: 吕曼 ; 类彦立 ; 李铁刚
 收藏  |  浏览/下载:4/0  |  提交时间:2024/12/18 玻璃质壳 底栖有孔虫 分子生物学 Ammonia DNA提取 保存 |
| 玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究 期刊论文 海洋与湖沼, 2016, 卷号: 47, 期号: 2, 页码: 346-353 作者: 吕曼 ; 类彦立 ; 李铁刚
Adobe PDF(3367Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:482/1  |  提交时间:2017/01/16 玻璃质壳 底栖有孔虫 分子生物学 Ammonia Dna 提取 保存 |
| 底栖有孔虫的不同壳质类型DNA提取技术比较及青岛湾潮间带分子多样性研究 学位论文 , 北京: 中国科学院大学, 2015 作者: 吕曼
Adobe PDF(2570Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:600/1  |  提交时间:2015/06/01 底栖有孔虫 Dna提取 Dna保存 Rdna 高通量测序 |
| 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 发明人: 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
Adobe PDF(757Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:629/2  |  提交时间:2014/08/04 1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法 其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼 滤去水后立即加入无水乙醇 2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 而后于?20℃或室温保存备用 加入生理盐水洗涤 3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水 加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液 4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液 再用滤纸吸干样品 使细胞破壁 震荡20?30秒。15000g离心30分钟 重复2?3次 而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶 吸取上清液使蛋白质去除 震荡混匀 然后在上清液中加入等体积异丙醇 于50?70℃温育 轻轻混匀 每10?20分钟颠倒混匀一次 ?20℃静置1?2小时 消化至溶液澄清 15000g离心15分钟 待用 沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。 |
| 一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23 发明人: 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛
Adobe PDF(1224Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:377/1  |  提交时间:2014/08/04 一种海蜇基因组dna提取方法 其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存 2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆、30~40ul质量浓度为10%的sds、3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k 封口后55~56℃消化0.8~1.0小时 3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6m?nacl 待用 振荡浑匀20~30s 10000~12000rpm离心20?30分钟 吸上清 而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇 ?20~?18℃沉淀10~15分钟 沉淀后取出 以10000~12000rpm离心15?20分钟 弃去液体 并用体积浓度为70%的乙醇 离心洗1~2次 自然室温凉干 即得到海蜇碟状体的dna。 |
| 一种海蜇基因组DNA的提取方法 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14 发明人: 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛
Adobe PDF(376Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:370/2  |  提交时间:2014/08/04 1.一种海蛰基因组dna提取方法 其特征在于:1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织 2)将步骤1)得到的原料内加入3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k 加入ctab Buffer300~400ul 在55~56℃消化24~26小时至溶液澄清 3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶液混匀 待用 待用 离心 而后向上清液中加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇 吸上清 -20~-18℃沉淀10~15分钟 其中苯酚、氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1 再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀 沉淀后取出 氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。 离心 离心 吸上清 弃去液体 并用体积浓度为70%的乙醇 离心洗1~2次 将多余液体倒去室温自然凉干 即得到海蛰螅状体的基因组dna |
| 龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20 发明人: 段德麟; 李文红; 胡自民
Adobe PDF(1224Kb)  |   收藏  |  浏览/下载:339/0  |  提交时间:2014/08/04 1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法 其特征在于:龙须菜的rdnaits全序列的获取 提取缓冲液的组成为:100mmoll-1tris.hcl 步骤如下:(1)总dna提取:取新鲜健康的藻体材料 Ph8.0 (2)Pcr扩增:龙须菜its区扩增的特异引物p1、p2的序列分别为:p1:5’gggatccgtttccgtaggtgaacctgc3’ 用无菌水处理后 50-100mmoll-1edta 位于18s上 P2:5’gggatccatatgcttaagttcagcgggt3’ (3)Pcr产物纯化 在液氮种研磨成粉末 0.2-0.5mnacl 位于26s上 利用该引物对步骤(1)提取的dna为模板 提取总dna 5%β-巯基乙醇 对总dna进行pcr扩增反应 0.2%pvp-40 (4)Dna序列测定:纯化后的dna进行序列测定 1.0-2.5%sds 确立rdnaits区 (5)Dna序列数据分析:待分析的rdnaits区的序列一经测定 提取所用的kac浓度为4.0-5.0m 包括its1和5.8s区的全序列 用对位排列软件clustalw进行对位排列 建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的rapd和issr特异指纹图谱 Ph值范围在5.2-7.5 并辅以人工校对 步骤如下:1)总dna提取 2)Rapd和issr引物的合成 用系统进化分析各样品dna序列与数据库中各个序列间的差异 从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物 3)根据扩增条带的多态性 构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的rapd和issr特异指纹图谱。 |
| 海湾扇贝样品不同保存条件下DNA的提取及RAPD扩增比较 CNKI期刊论文 2001 作者: 刘保忠,宋林生,相建海
 收藏  |  浏览/下载:3/0  |  提交时间:2024/12/20 海湾扇贝 DNA提取 RAPD |