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中国科学院海洋研究所机构知识库
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实验海洋生物学重点实... [1]
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相建海 [1]
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中国对虾抗菌肽基因的重组表达与应用
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN03112294.9, 申请日期: 2003-12-03, 公开日期: 2003-12-03
发明人:
王金星
;
赵小凡
;
相建海
;
李富花
Adobe PDF(481Kb)
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提交时间:2014/08/04
1.中国对虾抗菌肽基因的重组表达方法
包括重组载体构建、转化与筛选和表达产物鉴定、纯化和抗菌谱测定其特征在于
所述的转化与筛选是:将构建得到的载体分别转化大肠杆菌和酵母菌及转染昆虫细胞
所述的重组载体构建是:根据已克隆到的对虾素成熟肽的cdna序列
筛选工程菌株或细胞并诱导表达
所述的表达产物鉴定、纯化和抗菌谱测定是:采用诱导剂诱导表达的工程菌
利用特异引物在其两端引入两个不同的限制性内切酶位点
破细胞收集上清液
亚克隆到表达载体
分泌型表达的细胞直接收集上清液
载体包括pet系列、pgex-4t系列、ppic系列、pao815和杆状病毒表达载体
采用层析的方法纯化抗菌肽
并测定抗菌谱。