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响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件 期刊论文
海洋科学, 2015, 卷号: 39, 期号: 4, 页码: 56-63
作者:  周孙林;  陈华新;  姜鹏;  李富超;  唐东山
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重组别藻蓝蛋白α 亚基  诱导表达  优化  响应面法  中心组合设计  
中国对虾抗菌肽基因的重组表达与应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN03112294.9, 申请日期: 2003-12-03, 公开日期: 2003-12-03
发明人:  王金星;  赵小凡;  相建海;  李富花
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1.中国对虾抗菌肽基因的重组表达方法  包括重组载体构建、转化与筛选和表达产物鉴定、纯化和抗菌谱测定其特征在于  所述的转化与筛选是:将构建得到的载体分别转化大肠杆菌和酵母菌及转染昆虫细胞  所述的重组载体构建是:根据已克隆到的对虾素成熟肽的cdna序列  筛选工程菌株或细胞并诱导表达  所述的表达产物鉴定、纯化和抗菌谱测定是:采用诱导剂诱导表达的工程菌  利用特异引物在其两端引入两个不同的限制性内切酶位点  破细胞收集上清液  亚克隆到表达载体  分泌型表达的细胞直接收集上清液  载体包括pet系列、pgex-4t系列、ppic系列、pao815和杆状病毒表达载体  采用层析的方法纯化抗菌肽  并测定抗菌谱。