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中国科学院海洋研究所机构知识库
Knowledge Management System Of Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
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一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
发明人:
李鹏程
;
李荣锋
;
于华华
;
邢荣娥
;
刘松
;
秦玉坤
;
李克成
;
李冰
;
孟祥涛
;
崔金会
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提交时间:2014/08/04
一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法
收集采用含0.2m?nacl的磷酸缓冲液洗脱下的组分
其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤
所述洗脱液为含不同浓度nacl的磷酸缓冲液
滤液经含deae?sepharose?fast?flow阴离子交换柱
Nacl浓度分别为0、0.1、0.2、0.3和2m
采用洗脱液以1?3mlmin?1流速进行纯化分离
2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤
收集洗脱液在低温下用3~5k的超滤管进行浓缩
滤液经凝胶色谱柱superdex200采用0.15m?nacl
待用
10~50mm
ph7.0pbs缓冲液以0.2~1.0mlmin?1流速进行分离纯化
收集洗脱体积处于60~80ml的洗脱液
而后在2~6℃下用3~5k的超滤管进行浓缩
浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。