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中国科学院海洋研究所机构知识库
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坛紫菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆与序列分析
期刊论文
海洋科学, 2011, 期号: 4, 页码: 70-76
作者:
张晓娟
;
王广策
;
何林文
;
陈昌生
Adobe PDF(652Kb)
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浏览/下载:259/0
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提交时间:2013/09/27
坛紫菜
Pepc基因
序列分析
系统进化分析
羽藻再生过程中基因表达及其光合作用的研究
学位论文
, 北京: 中国科学院研究生院, 2010
作者:
吕芳
Adobe PDF(3035Kb)
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浏览/下载:314/2
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提交时间:2012/06/20
藓羽藻
叶绿体基因组
基因表达分析
系统进化分析
光合作用
龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
发明人:
段德麟
;
李文红
;
胡自民
Adobe PDF(1224Kb)
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浏览/下载:335/0
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提交时间:2014/08/04
1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
其特征在于:龙须菜的rdnaits全序列的获取
提取缓冲液的组成为:100mmoll-1tris.hcl
步骤如下:(1)总dna提取:取新鲜健康的藻体材料
Ph8.0
(2)Pcr扩增:龙须菜its区扩增的特异引物p1、p2的序列分别为:p1:5’gggatccgtttccgtaggtgaacctgc3’
用无菌水处理后
50-100mmoll-1edta
位于18s上
P2:5’gggatccatatgcttaagttcagcgggt3’
(3)Pcr产物纯化
在液氮种研磨成粉末
0.2-0.5mnacl
位于26s上
利用该引物对步骤(1)提取的dna为模板
提取总dna
5%β-巯基乙醇
对总dna进行pcr扩增反应
0.2%pvp-40
(4)Dna序列测定:纯化后的dna进行序列测定
1.0-2.5%sds
确立rdnaits区
(5)Dna序列数据分析:待分析的rdnaits区的序列一经测定
提取所用的kac浓度为4.0-5.0m
包括its1和5.8s区的全序列
用对位排列软件clustalw进行对位排列
建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的rapd和issr特异指纹图谱
Ph值范围在5.2-7.5
并辅以人工校对
步骤如下:1)总dna提取
2)Rapd和issr引物的合成
用系统进化分析各样品dna序列与数据库中各个序列间的差异
从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物
3)根据扩增条带的多态性
构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的rapd和issr特异指纹图谱。