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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
发明人:  韩丽君;  袁毅;  郭书举;  曲桂艳;  刘旭
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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法  其特征在于:1)将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h  酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液  稀酸浸泡液待用  搅拌浸泡4‑7h  2)将上层漂浮物调节至ph5.5‑6.5  保留上层漂浮物  收集水浸泡液  在经过滤或高速离心  将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎  将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用  收集过滤液a  破碎后进行离心分离收集上清液b  3)将上述合并液、过滤液a和上清液b混合均匀后进行超滤去除盐分  而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积(v/w)  4)将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解  浓缩液进行醇沉淀  溶解后通过装有deae‑sepharose f.f.的阴离子交换树脂柱进行洗脱  沉淀物干燥  收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得  即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品  即得到原藻重量1.5‑2.3%的岩藻聚糖硫酸酯。  
一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310517084.1, 申请日期: 2014-02-05, 公开日期: 2014-02-05
发明人:  刘清华;  李军;  韩龙江;  肖志忠;  孔宁
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一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法  其特征在于:a.优质亲鲍的选择  B.亲鲍阴干刺激  选择自然海区人工养殖的性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍或将由自然海区人工养殖的雄性亲鲍经暂养性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍  将雄性亲鲍从暂养池中捞出  c.将上述阴干刺激后的雄性亲鲍置于经紫外线照射过并升温至20?21℃的海水中  腹面朝上避光阴干刺激1.5?2小时  于黑暗环境下刺激0.5?1小时  D.将上述收集的精子离心收集浑浊液  直至排精  即得皱纹盘鲍精子。  
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22
发明人:  黄雯;  阙华勇;  许飞;  李莉;  张国范
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一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法  其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状  2)研磨后进行低温干燥  分成ab两部分分别用于以下步骤  3)将a部分样品准确称量干重后  按固定比例加入0.01mol/l?naoh溶液  4)8000?12000rpm离心5?10min  2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素  取上清  5)取步骤4)中的上清  用于定量检测甲状腺激素的含量  即总甲状腺素t4和总3  7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量  5  6)将b部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和pmsf室温放置1h以上  3′?三碘甲腺原氨酸t3  裂解细胞释放蛋白  8)将数据整合  计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克  即xg/gprotein。  
一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法  其特征在于:将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻  其中  溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液  稀释液为nacl  离心收集沉淀  Kh2po4和水组成。  而后与牙鲆卵子进行人工授精  
一种从海参加工废弃物中提取活性物质的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310176271.8, 申请日期: 2013-08-28, 公开日期: 2013-08-28
发明人:  袁坤山;  王宝杰;  王雷;  刘梅;  蒋克勇
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醇沉后沉淀脱色、离心、盐沉、透析即得到海参多糖  一种从海参加工废弃物中提取活性物质的方法  其特征在于:以海参内脏团为原料  上述水饱和正丁醇萃取后的水溶液经过脱色、灭菌即得到抗氧化活性海参多肽。  经过预处理、酶解、回流提取、醇沉  醇沉后上清液经过旋转蒸发、萃取脱脂、水饱和正丁醇萃取  水饱和正丁醇萃取所得萃取液经旋转蒸发、大孔吸附树脂色谱提取  即得到精制海参皂甙  
一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310140315.1, 申请日期: 2013-08-07, 公开日期: 2013-08-07
发明人:  李鹏程;  薛伟;  于华华;  李荣锋;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  陈晓琳;  胡林峰
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一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法  其特征在于:将冷冻溶解后水母触手离心  收集上清液  上清液经离心后  收集沉淀  将沉淀用海水溶解后  过滤收集滤液  离心后收集的沉淀为高纯度未释放的水母刺丝囊。  
一种鲐鱼活性肽的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310002099.4, 申请日期: 2013-05-08, 公开日期: 2013-05-08
发明人:  李鹏程;  王雪芹;  邢荣娥;  刘松;  于华华;  李克成;  李冰;  秦玉坤;  李荣锋
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一种鲐鱼活性肽的制备方法  其中每克经绞碎的原材料鲐鱼中加入1000u~2000u酶活力单位的蛋白酶。  其特征在于:以鲐鱼作为原材料经绞碎  调节ph值后加入蛋白酶进行酶解反应5h~8h  加入去离子水置于恒温水浴中经搅拌保温5~10min  反应完毕后  再调节ph值  酶灭活  离心  收集上清液  冷冻干燥  即得鲐鱼活性肽  
一种制备α-Fe2O3纳米球的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210323134.8, 申请日期: 2013-05-01, 公开日期: 2013-05-01
发明人:  李鹏程;  魏振华;  邢荣娥;  刘松;  于华华;  秦玉坤;  李荣峰;  李克成;  李冰;  王雪芹
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一种制备α‑fe2o3纳米球的方法  其特征在于:1)以六水合三氯化铁(fecl3·6h2o)为铁源  其中  尿素(co(Nh2)2)为氢氧根离子引发剂  六水合三氯化铁与尿素摩尔比为1:1‑1.5  2)将上述微波处理后产物自然冷却后离心  将铁源与引发剂利用超声溶解于甘油和水组成的混合溶剂中  铁源浓度为1.0‑1.5mol/l  所得沉淀采用乙醇和水进行交替洗涤  而后置于密闭条件下进行微波处理  甘油和水体积比为1:2‑9  洗涤后干燥  在130‑150℃进行微波处理20‑50min  即得平均直径300‑500nm、整体结构由尺寸约20‑50nm的棒状纳米亚单元构成的α‑fe2o3纳米球。  
一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110416253.3, 申请日期: 2012-06-20, 公开日期: 2012-06-20
发明人:  戚鹏;  张盾;  万逸
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一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法  其特征在于:将待测样品离心后  沉淀于选择性培养基中厌氧条件下培养3?4天  离心取上清液  并加入上清液1/9体积的硝酸锌溶液混合均匀后离心取沉淀  沉淀中加入亚甲基蓝溶液混合均匀后在紫外灯下照射1.5?2.0小时  即可通过吸光度待测样品中检测硫酸盐还原菌。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  破碎后2~6℃离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后用含con?a?sepharose?4b亲和柱进行分离  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂mono?q预装柱纯化分离  待用  待用  分离时采用含有0.1~0.3mα?甲基?d?甘露糖苷和0.1~0.3mnacl的ph7.4  依次采用ph7.8  浓度10~30mm的tris?hcl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液和含1m?nacl的ph7.8  低温离心  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  收集上清液  流速为0.2~0.5mlmin?1  待用  收集约25~40min洗脱液  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。