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龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
发明人:
段德麟
;
李文红
;
胡自民
Adobe PDF(1224Kb)
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提交时间:2014/08/04
1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
其特征在于:龙须菜的rdnaits全序列的获取
提取缓冲液的组成为:100mmoll-1tris.hcl
步骤如下:(1)总dna提取:取新鲜健康的藻体材料
Ph8.0
(2)Pcr扩增:龙须菜its区扩增的特异引物p1、p2的序列分别为:p1:5’gggatccgtttccgtaggtgaacctgc3’
用无菌水处理后
50-100mmoll-1edta
位于18s上
P2:5’gggatccatatgcttaagttcagcgggt3’
(3)Pcr产物纯化
在液氮种研磨成粉末
0.2-0.5mnacl
位于26s上
利用该引物对步骤(1)提取的dna为模板
提取总dna
5%β-巯基乙醇
对总dna进行pcr扩增反应
0.2%pvp-40
(4)Dna序列测定:纯化后的dna进行序列测定
1.0-2.5%sds
确立rdnaits区
(5)Dna序列数据分析:待分析的rdnaits区的序列一经测定
提取所用的kac浓度为4.0-5.0m
包括its1和5.8s区的全序列
用对位排列软件clustalw进行对位排列
建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的rapd和issr特异指纹图谱
Ph值范围在5.2-7.5
并辅以人工校对
步骤如下:1)总dna提取
2)Rapd和issr引物的合成
用系统进化分析各样品dna序列与数据库中各个序列间的差异
从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物
3)根据扩增条带的多态性
构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的rapd和issr特异指纹图谱。
栉孔扇贝16S rRNA基因片段序列的多态性研究
CNKI期刊论文
2002
作者:
刘亚军,喻子牛,姜艳艳,张留所,孔晓瑜,宋林生
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提交时间:2024/12/20
栉孔扇贝
线粒体DNA
16SrRNA基因
DNA序列测定
栉孔扇贝16SrRNA基因片段序列的多态性研究
期刊论文
海洋与湖沼, 2002, 卷号: 33.0, 期号: 005, 页码: 477-483
作者:
刘亚军
;
喻子牛
;
姜艳艳
;
张留所
;
孔晓瑜
;
宋林生
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提交时间:2021/07/27
栉孔扇贝
线粒体DNA
16SrRNA基因
DNA序列测定
PCR技术
克隆
核苷酸序列
多态性
魁蚶线粒体16S rRNA和COI基因片段序列测定及其应用前景
CNKI期刊论文
2001
作者:
孔晓瑜,姜艳艳,相建海,喻子牛,刘亚军
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浏览/下载:3/0
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提交时间:2024/12/20
魁蚶(Scapharcabroughtonii)
16SrDNA
COI
序列测定
栉孔扇贝核糖体RNA转录间区域的序列测定
CNKI期刊论文
2000
作者:
孔晓瑜,刘亚军,喻子牛,宋林生,孙修勤
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浏览/下载:3/0
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提交时间:2024/12/20
栉孔扇贝
核糖体RNA转录间区域
序列测定
养殖牙鲆淋巴囊肿病病原的研究
CNKI期刊论文
2000
作者:
徐洪涛,朴春爱,姜忠良,王文兴
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浏览/下载:2/0
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提交时间:2024/12/20
牙鲆
虹彩病毒
淋巴囊肿病
DNA序列测定
栉孔扇贝核糖体RNA转录间区域的序列测定
期刊论文
海洋科学, 2000, 期号: 11, 页码: 1-3
作者:
孔晓瑜
;
刘亚军
;
喻子牛
;
宋林生
;
孙修勤
Adobe PDF(262Kb)
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浏览/下载:285/0
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提交时间:2013/10/08
栉孔扇贝
核糖体rna转录间区域
序列测定
养殖牙鲆淋巴囊肿病病原的研究
期刊论文
病毒学报, 2000, 期号: 3, 页码: 223-226
作者:
徐洪涛
;
朴春爱
;
姜忠良
;
王文兴
Adobe PDF(179Kb)
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提交时间:2013/10/08
牙鲆
虹彩病毒
淋巴囊肿病
Dna序列测定