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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  肖志忠;  韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法  其特征在于:将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合  抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中  添加剂:蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄(v/v)。  混合后经过两步降温处理  稀释液为nacl8g/l  抗冻剂为终浓度60%(v/v)的dmso(二甲基亚砜)或终浓度60%(v/v)  一步平衡后投入到液氮(‑196℃)  Kcl0.4g/l  的丙二醇(pg)  分装保存  Mgso4·7h2o0.1g/l  Mgcl2·6h2o0.1g/l  Na2hpo4·2h2o0.06g/l  Kh2po40.06g/l  Nahco30.35g/l  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成  其特征在于:将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合  处理后投入到液氮(‑196℃)  在0℃孵育6‑8分钟  分装保存  抗冻剂为终浓度8%的(v/v)dmso(二甲基亚砜)和终浓度7%的(v/v)gly(甘油)  孵育后以分段方式降温处理  其中  稀释液为100mm蔗糖  100mm khco3  添加剂:5mm还原型谷胱甘肽  25mm nahco3  50mm牛磺酸  10%蛋黄(v/v)。  
太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  于道德;  官曙光
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孵育后以分段方式降温处理  一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法  其特征在于:将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合  混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟  处理后投入到液氮(‑196℃)  抗冻剂为终浓度10%(v/v)的丙二醇(pg)  分装保存  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成  添加剂为:终浓度5%(v/v)的蛋黄和终浓度5%bsa(v/v)。  其中稀释液为:nacl 8g/l  Na2hpo4·2h2o0.6g/l  Kh2po40.6g/l  海藻糖37.8g/l