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中国科学院海洋研究所机构知识库
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:
刘清华
;
李军
;
肖志忠
;
韩龙江
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提交时间:2014/08/04
一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法
其特征在于:将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合
抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中
添加剂:蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄(v/v)。
混合后经过两步降温处理
稀释液为nacl8g/l
抗冻剂为终浓度60%(v/v)的dmso(二甲基亚砜)或终浓度60%(v/v)
一步平衡后投入到液氮(‑196℃)
Kcl0.4g/l
的丙二醇(pg)
分装保存
Mgso4·7h2o0.1g/l
Mgcl2·6h2o0.1g/l
Na2hpo4·2h2o0.06g/l
Kh2po40.06g/l
Nahco30.35g/l
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:
刘清华
;
李军
;
徐世宏
;
韩龙江
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提交时间:2014/08/04
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法
所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成
其特征在于:将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合
处理后投入到液氮(‑196℃)
在0℃孵育6‑8分钟
分装保存
抗冻剂为终浓度8%的(v/v)dmso(二甲基亚砜)和终浓度7%的(v/v)gly(甘油)
孵育后以分段方式降温处理
其中
稀释液为100mm蔗糖
100mm khco3
添加剂:5mm还原型谷胱甘肽
25mm nahco3
50mm牛磺酸
10%蛋黄(v/v)。
太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:
刘清华
;
李军
;
于道德
;
官曙光
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提交时间:2014/08/04
孵育后以分段方式降温处理
一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法
其特征在于:将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合
混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟
处理后投入到液氮(‑196℃)
抗冻剂为终浓度10%(v/v)的丙二醇(pg)
分装保存
所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成
添加剂为:终浓度5%(v/v)的蛋黄和终浓度5%bsa(v/v)。
其中稀释液为:nacl 8g/l
Na2hpo4·2h2o0.6g/l
Kh2po40.6g/l
海藻糖37.8g/l