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仿刺参精子超低温冷冻损伤机制与保存技术研究 学位论文
理学学位, 中国科学院海洋研究所: 中国科学院大学, 2023
作者:  xu shuai
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刺参  精子  超低温冷冻保存  精子抗冻能力  
一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
发明人:  韩丽君;  袁毅;  郭书举;  曲桂艳;  刘旭
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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法  其特征在于:1)将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h  酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液  稀酸浸泡液待用  搅拌浸泡4‑7h  2)将上层漂浮物调节至ph5.5‑6.5  保留上层漂浮物  收集水浸泡液  在经过滤或高速离心  将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎  将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用  收集过滤液a  破碎后进行离心分离收集上清液b  3)将上述合并液、过滤液a和上清液b混合均匀后进行超滤去除盐分  而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积(v/w)  4)将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解  浓缩液进行醇沉淀  溶解后通过装有deae‑sepharose f.f.的阴离子交换树脂柱进行洗脱  沉淀物干燥  收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得  即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品  即得到原藻重量1.5‑2.3%的岩藻聚糖硫酸酯。  
一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架 专利
专利类型: 实用新型, 专利号: CN201320245231.X, 申请日期: 2013-10-30, 公开日期: 2013-10-30
发明人:  刘清华;  李军;  柳意樊;  徐世宏
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一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架  其特征在于:包括一体式框架(1)和托盘(2)  当托盘(2)不悬挂冻存管时  其中一体式框架(1)为一侧开放式结构  在一体式框架(1)的开口侧或与开口侧相对的另一侧抽取托盘(2)。  所述一体式框架(1)上沿高度方向设有多个托盘(2)  各托盘(2)均水平放置、并相互平行  所述托盘(2)上布设有多个用于悬挂冻存管的孔  当托盘(2)悬挂冻存管时  在一体式框架(1)的开口侧抽取托盘  
一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  肖志忠;  韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法  其特征在于:将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合  抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中  添加剂:蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄(v/v)。  混合后经过两步降温处理  稀释液为nacl8g/l  抗冻剂为终浓度60%(v/v)的dmso(二甲基亚砜)或终浓度60%(v/v)  一步平衡后投入到液氮(‑196℃)  Kcl0.4g/l  的丙二醇(pg)  分装保存  Mgso4·7h2o0.1g/l  Mgcl2·6h2o0.1g/l  Na2hpo4·2h2o0.06g/l  Kh2po40.06g/l  Nahco30.35g/l  
一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法  其特征在于:将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻  其中  溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液  稀释液为nacl  离心收集沉淀  Kh2po4和水组成。  而后与牙鲆卵子进行人工授精  
一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214338.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  王文琪;  徐世宏;  韩龙江
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一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法  其特征在于:1)冷冻保存:将活力高于85%的夏鲆精子与抗冻液以1:3‑1:2的体积比混合  2)解冻:将上述冻存冻精于亲鱼车间的循环水中即可解冻  混合后置于容器内再一并移入液氮罐内进行一步预冷  待冻精由固态融化为液态置于0‑4℃冰箱中保存备用。  两步冷冻  而后投入液氮中进行长期保存  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成  其特征在于:将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合  处理后投入到液氮(‑196℃)  在0℃孵育6‑8分钟  分装保存  抗冻剂为终浓度8%的(v/v)dmso(二甲基亚砜)和终浓度7%的(v/v)gly(甘油)  孵育后以分段方式降温处理  其中  稀释液为100mm蔗糖  100mm khco3  添加剂:5mm还原型谷胱甘肽  25mm nahco3  50mm牛磺酸  10%蛋黄(v/v)。  
太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  于道德;  官曙光
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孵育后以分段方式降温处理  一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法  其特征在于:将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合  混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟  处理后投入到液氮(‑196℃)  抗冻剂为终浓度10%(v/v)的丙二醇(pg)  分装保存  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成  添加剂为:终浓度5%(v/v)的蛋黄和终浓度5%bsa(v/v)。  其中稀释液为:nacl 8g/l  Na2hpo4·2h2o0.6g/l  Kh2po40.6g/l  海藻糖37.8g/l  
一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310140315.1, 申请日期: 2013-08-07, 公开日期: 2013-08-07
发明人:  李鹏程;  薛伟;  于华华;  李荣锋;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  陈晓琳;  胡林峰
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一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法  其特征在于:将冷冻溶解后水母触手离心  收集上清液  上清液经离心后  收集沉淀  将沉淀用海水溶解后  过滤收集滤液  离心后收集的沉淀为高纯度未释放的水母刺丝囊。  
一种鲐鱼活性肽的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310002099.4, 申请日期: 2013-05-08, 公开日期: 2013-05-08
发明人:  李鹏程;  王雪芹;  邢荣娥;  刘松;  于华华;  李克成;  李冰;  秦玉坤;  李荣锋
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一种鲐鱼活性肽的制备方法  其中每克经绞碎的原材料鲐鱼中加入1000u~2000u酶活力单位的蛋白酶。  其特征在于:以鲐鱼作为原材料经绞碎  调节ph值后加入蛋白酶进行酶解反应5h~8h  加入去离子水置于恒温水浴中经搅拌保温5~10min  反应完毕后  再调节ph值  酶灭活  离心  收集上清液  冷冻干燥  即得鲐鱼活性肽