Knowledge Management System Of Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
| 产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进 | |
| 姜进举; 张宏宇; 任宝永; 施斐; 崔玉琳; 秦松 | |
| 发表期刊 | 中国生物工程杂志
 |
| ISSN | 1671-8135 |
| 2011-08-15 | |
| 出版年 | 2011 |
| 卷号 | v.31;No.233期号:08页码:79-84 |
| 文献类型 | CNKI期刊论文 |
| 摘要 | adhB和pdc是运动发酵单胞菌产乙醇途径的关键基因,分别编码乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶,将添加有聚球藻PCC7942rbcLS基因RBS序列的adhB和pdc基因插入pUC18载体,经双重菌液PCR检验和酶切检验得到分别含有pUC-adhB、pUC-pdc和pUC-adhB-pdc载体的3个重组菌株。活性检测实验表明聚球藻PCC7942的rbcLS基因的RBS序列能有效介导运动发酵单胞菌的adhB和pdc基因在大肠杆菌中表达,摇瓶发酵实验表明重组大肠杆菌的产乙醇能力较出发菌株大幅提升。鉴于乙醛指示平板法存在着对希夫试剂的要求较高、易产生较强的背景色等缺点,对定性检测丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶表达菌株的方法做了改进,即:将菌液诱导表达,然后分别添加对应于两种酶的底物,让酶与底物反应0.5至1小时,之后再加希夫试剂进行显色反应,结果表明改进后的方法比乙醛指示平板法更加简便、快速、可靠。 |
| 关键词 | 生物乙醇 丙酮酸脱羧酶 乙醇脱氢酶 乙醛指示平板 运动发酵单胞菌 蓝藻 |
| CNKI专辑号 | A;B; |
| CNKI专辑名称 | 基础科学;工程科技Ⅰ辑; |
| CNKI专题号 | B016; |
| CNKI专题名称 | 有机化工; |
| 分类号 | TQ223.122 |
| 收录类别 | 北大核心 ; 中科院核心 |
| 语种 | 中文; |
| DOI | 10.13523/j.cb.20110813 |
| 资助项目(基金） | 国家自然科学基金(40876082) ; 山东省自然科学杰出青年基金(JQ200914)资助项目 |
| 引用统计 | |
| 文献类型 | CNKI期刊论文 |
| 条目标识符 | http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/191600 |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.中国科学院烟台海岸带研究所 2.中国科学院研究生院 3.中国科学院海洋研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 姜进举,张宏宇,任宝永,等. 产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进. 2011. |
| 条目包含的文件 | 条目无相关文件。 | |||||
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