IOCAS-IR  > 实验海洋生物学重点实验室
衣藻FAB2基因分离及功能鉴定以及不同胁迫条件下表达模式研究
郭雪洁
学位类型硕士
导师秦松
2011-05-24
学位授予单位中国科学院研究生院
学位专业海洋生物学
关键词莱茵衣藻 Δ9脂肪酸去饱和酶 实时荧光定量pcr Gc-ms
摘要不饱和脂肪酸是机体生物膜的重要组成成分,对生物膜结构、机能、相转变、通透性的调节及相关过程的调控有重要作用。并且,它参与细胞生物化学反应、转运过程和细胞应激反应,影响脂肪代谢、寻靶作用、免疫反应、耐寒、抗氧化等生理过程。此外,不饱和脂肪酸还是哺乳动物体内生成前列腺素、凝血哑烷和白三烯等激素的前体,具有提高人体免疫力、预防心血管疾病和癌症等重要的生 理功能。环境因素(如温度、光照等)是通过某些分子机理来实现对去饱和酶的表达及其活性调控,使细胞得以迅速改变脂肪酸的组成来适应环境的变化。Δ9脂肪酸去饱和酶又是合成不饱和脂肪酸的第一个酶,所以对基础研究有很大的价值。本文分离了模式绿藻莱茵衣藻中Δ9脂肪酸去饱和酶基因并对该基因的功能进行了研究。本研究针对未验证功能的衣藻FAB2基因开展以下研究工作: 1、目的基因克隆,运用相关生物信息学软件进行序列分析等,除了对蛋白质的相关特性进行预测外,还对其进行了系统进化分析,发现与高等植物的该基因同源性很高。 2、目的基因原核表达:为后来要做的体外活性功能测定做铺垫; 3、目的基因不同胁迫条件下表达模式研究:选用几个合适的温度和盐度梯度对对数期的衣藻进行诱导,应用实时荧光定量技术进行基因相对表达量测定,初步发现低温和高盐胁迫下基因表达量均有一定程度升高; 4、目的基因功能验证:需先构建聚球藻7942Desc突变株,然后将目的基因转至该突变株中进行功能验证;除此之外,还进行体内活性测定(在大肠杆菌内,加入外源底物的情况下,GC-MS法检测产物峰)。
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17773
专题实验海洋生物学重点实验室
推荐引用方式
GB/T 7714
郭雪洁. 衣藻FAB2基因分离及功能鉴定以及不同胁迫条件下表达模式研究[D]. 中国科学院研究生院,2011.
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