Institutional Repository of Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
| 虹鳟肿瘤坏死因子（TNFα）基因体外表达与纯化的研究 | |
| 蔡中华1; 宋林生1; Zou Jun2; C J Secombes2; 董双林3 | |
| 2003 | |
| 发表期刊 | 水生生物学报
 |
| ISSN | 1000-3207 |
| 卷号 | 27.0期号:006页码:596-601 |
| 摘要 | 将虹鳟两种肿瘤坏死因子TNFα和TNFα2基因的成熟肽编码区域，用带有BamHI和HindⅢ酶切位点的基因特异性引物进行：PCR扩增。扩增片段用限制性内切酶消化并连接到pQE30表达载体上，连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细菌中。转化子经PCR筛选，质粒测序，完成了虹鳟两种TNFα基因重组子的构建。重组子经体外培养和诱导后，获得了高效表达的TNFα重组蛋白。高效表达的重组TNFα不受诱导剂IPTG的影响，并且由于重组子高效表达而形成了包涵体；重组蛋白产量约占菌体蛋白总量的25％—30％。应用Ni-NTA和固定金属亲和层析(IM-PC)技术，在变性条件下获得了高度纯化的重组蛋白，纯化重组蛋白的产量约为0．5—1mg／L。 |
| 关键词 | 肿瘤坏死因子 重组 纯化 基因体外表达 感受态细菌 |
| 收录类别 | CSCD |
| 语种 | 中文 |
| CSCD记录号 | CSCD:1172109 |
| 引用统计 | |
| 文献类型 | 期刊论文 |
| 条目标识符 | http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/175523 |
| 专题 | 实验海洋生物学重点实验室 |
| 作者单位 | 1.中国科学院海洋研究所 2.阿伯丁大学 3.中国海洋大学 |
| 第一作者单位 | 中国科学院海洋研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 蔡中华,宋林生,Zou Jun,等. 虹鳟肿瘤坏死因子（TNFα）基因体外表达与纯化的研究[J]. 水生生物学报,2003,27.0(006):596-601. |
| APA | 蔡中华,宋林生,Zou Jun,C J Secombes,&董双林.(2003).虹鳟肿瘤坏死因子（TNFα）基因体外表达与纯化的研究.水生生物学报,27.0(006),596-601. |
| MLA | 蔡中华,et al."虹鳟肿瘤坏死因子（TNFα）基因体外表达与纯化的研究".水生生物学报 27.0.006(2003):596-601. |
| 条目包含的文件 | 条目无相关文件。 | |||||
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