Institutional Repository of Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
| 一种海蜇基因组DNA的提取方法 | |
| 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛 | |
| 2009-01-14 | |
| 专利权人 | 中国科学院海洋研究所. |
| 公开日期 | 2009-01-14 |
| 专利类型 | 发明 |
| 摘要 | 本发明涉及基因工程技术，具体的说是一种海蜇基因组DNA的提取方法。具体为将海蜇用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织，加入CTAB buffer、蛋白酶K，在55～56℃消化24～26小时至溶液澄清；或将海蜇置入95％的酒精中脱水并加入buffer、SDS、蛋白酶K，封口后55～56℃消化0.8～1.0小时；而后混合苯酚、氯仿和异戊醇，离心，吸上清，再加入氯仿和异戊醇混合液混匀，离心，吸上清；再在上清液中加异丙醇，沉淀10～15分钟，沉淀后取出，离心，弃去液体，并用乙醇，离心洗涤，将多余液体倒去室温自然凉干，即得到海蛰基因组DNA。采用本发明可提取高质量的海蜇全基因组DNA，且方法简单、经济、易于操作，适合在普通生物实验室中进行。 |
| 关键词 | 1.一种海蛰基因组dna提取方法 其特征在于：1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织 2)将步骤1)得到的原料内加入3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k 加入ctab Buffer300～400ul 在55～56℃消化24～26小时至溶液澄清 3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶液混匀 待用 待用 离心 而后向上清液中加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇 吸上清 -20～-18℃沉淀10～15分钟 其中苯酚、氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1 再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀 沉淀后取出 氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。 离心 离心 吸上清 弃去液体 并用体积浓度为70％的乙醇 离心洗1～2次 将多余液体倒去室温自然凉干 即得到海蛰螅状体的基因组dna |
| 申请日期 | 2007-07-13 |
| 专利号 | CN200710015295.X |
| 语种 | 中文 |
| 专利状态 | 公开 |
| 申请号 | CN200710015295.X |
| 文献类型 | 专利 |
| 条目标识符 | http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17385 |
| 专题 | 实验海洋生物学重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 崔朝霞,张姝,栾维莎,等. 一种海蜇基因组DNA的提取方法. CN200710015295.X[P]. 2009-01-14. |
| 条目包含的文件 | ||||||
| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| 一种海蜇基因组DNA的提取方法.pdf（376KB） | 限制开放 | CC BY-NC-SA | 浏览 | |||
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